1. 引言
本指南旨在为化学和生物药物在生物基质中定量及分析研究样本的应用提供验证生物分析方法的建议，确保生物分析数据的质量和一致性，以支持化学和生物药物的开发和上市审批。目标是验证生物分析方法，证明其适用于预定用途，并鼓励申请人与相关监管机构就建议的变化进行咨询。
2. 基本原则
生物分析方法验证是确保分析性能的接受性以及分析结果可靠性的必要手段。验证过程包括方法开发、选择性、特异性、方法开发、方法验证（完整验证、部分验证、交叉验证）等步骤。
3. 色谱法
色谱法是生物分析方法中常用的技术之一，其验证过程包括以下要素：
- 参考标准：应具有良好的特征描述，并确保参照标准的质量。
- 验证：
- 选择性：评估分析物在空白生物基质中存在潜在干扰物质的情况下，区分和测量分析物的能力。
- 特异性：检测分析物并将其与其他物质（包括其相关物质）区分开的能力。
- 矩阵效应：评估样品基质中存在的干扰成分导致分析物响应的变化。
- 校准曲线和范围：建立实际分析物浓度与分析平台对分析物的响应之间的关系。
- 准确性和精密度：通过分析质量控制样品来评估。
- 稀释完整性：评估样本稀释程序对分析物浓度的准确度和精密度的影响。
- 稳定性：评估分析物在特定储存和使用条件下的完整性。
- 重新注入再现性：评估处理样本的可行性。
4. 配体结合测定
配体结合测定（LBA）是另一种常用的生物分析方法，其验证过程包括以下要素：
- 关键试剂：包括结合试剂（如抗体、结合蛋白）以及含有酶活性基团的试剂，其质量应得到保证。
- 验证：
- 选择性：评估结合试剂特异性地结合到目标分析物的能力。
- 校准曲线和范围：建立实际分析物浓度与分析平台对分析物的响应之间的关系。
- 准确度和精密度：通过分析质量控制样品来评估。
- 稀释线性性和钩效应：评估样品稀释对分析物测量的影响。
- 稳定性：评估分析物在特定储存和使用条件下的完整性。
5. 研究样本分析
研究样本分析应在验证完成后进行，包括以下要素：
- 分析运行：包括空白样品、校准标准、质量控制样品和研究样品。
- 分析运行接受标准：校准标准和质量控制样品应满足预定义的接受标准。
- 校准范围：应涵盖所有质控样品。
- 研究样本的重新分析：在特定情况下，需要对研究样本进行重新分析，例如分析运行失败或观察到不可报告的结果。
6. 部分验证与交叉验证
- 部分验证：评估对已完全验证的分析方法所做的修改。
- 交叉验证：评估两种生物分析方法或同一生物分析方法在不同实验室之间可能存在的偏差，以确定报告的数据是否可比。
7. 其他考虑因素
- 分析物也是内源性分子的分析方法：需要考虑内源性水平的变化和分析方法的特异性。
- 最小必要稀释：评估样品稀释对分析物测量的影响。
- 商业和诊断试剂盒：需要评估试剂盒的验证以确保其符合药物开发的标准。
- 新技术或替代技术：在使用新或替代技术时，需要进行交叉验证。
8. 文档
所有必要的相关文档，包括原始数据、方案和报告、支持程序性、操作性和环境方面的记录，以及所有相关方之间的通讯记录，应保存在一个安全的环境中。
9. 词汇表
本指南提供了相关术语的定义，以确保理解和一致性。
