小核酸药物简介
小核酸药物是指由核苷酸序列构成的药物，通过作用于mRNA干预靶标基因进行治疗。目前主要有三类小核酸药物：ASO（反义寡核苷酸）、RNAi（RNA干扰）和RNAa（RNA激活）。
小核酸药物历史简介
小核酸药物原理——ASO
反义寡核苷酸（ASO）是化学合成的单链RNA或DNA，能与目标RNA序列互补配对。ASO的作用机制有两种：多数ASO与靶标mRNA结合后，引发RNase H1或Ago2酶降解mRNA；少数ASO与mRNA结合后仅占位，阻止其翻译成蛋白质。
小核酸药物原理——RNAi
- siRNA：目前最成熟的RNAi技术。引入外源性dsRNA，被Dicer切割成siRNA，在胞浆内与蛋白质形成RISC，反义链降解，反义链保留并切割靶mRNA，实现基因沉默。
- miRNA：药物均处于临床阶段。由内源性pre-miRNA形成，被Dicer切割成miRNA双链，与AGO等形成miRISC，反义链引导miRISC与靶mRNA结合使其沉默。研发思路包括注射外源性miRNA类似物或miRNA抑制剂。
小核酸药物优势
- 设计简便，研发成功率高、周期短：基于碱基互补原理，DNA测序技术发展使设计小核酸药物容易。
- 靶点丰富，适应症分布广泛：涉及癌症、自免、抗感染、眼科、罕见病等领域。
- 药效持久、给药次数少：RNA诱导的沉默复合体可循环工作，药效持久，患者依从性高。
- 转化基础深厚：ASO和RNA干扰技术成熟，转化相对容易。
- 静脉滴注给药，仅需每三周给药一次。
小核酸药物设计要点
- 增强稳定性：通过化学修饰（如糖、磷酸酯、碱基修饰）和纳米化设计提高稳定性，避免被核酸酶降解。
- 增强靶向性：通过设计合适的药物递送系统（如脂质纳米粒LNP、GalNAc）提高靶向性，减少脱靶效应。
- 化学修饰：主要包括磷酸骨架修饰、核糖修饰、核糖五元环修饰、碱基修饰和末端改造。
RNAi化学修饰专利概况
RNAi化学修饰专利——核糖修饰
- Ionis专利族1：涉及寡核苷酸的2'-核糖修饰，相关专利已失效。
- Ionis专利族2：涉及寡核苷酸修饰以获得酶介导的靶标mRNA裂解，部分专利已失效。
- Ionis专利族3：涉及LNA（锁定核糖核酸）修饰专利，美欧日同族专利均已授权。
RNAi化学修饰专利——磷酸酯修饰
- 硫代磷酸酯（PS）修饰：最广泛使用的磷酸酯修饰，提高核酸酶抗性，不涉及基础专利。
- 5’-(E)-乙烯基膦酸酯：提高与AGO2蛋白的结合亲和力，促使其加载至RISC复合物中，最早由Ionis开发。
Alnylam VS Tekmira侵权诉讼
Alnylam曾面临Tekmira关于siRNA脂质纳米颗粒（SLNP）递送技术的专利诉讼，最终支付6500万美元并重组许可协议。
案例看siRNA中国专利授权标准
案例一：Alnylam专利ZL201580072874.0无效案
- 无效请求理由：权利要求不清楚、得不到说明书支持、说明书公开不充分、缺乏创造性。
- 无效决定：专利权人修改权利要求后维持有效，合议组认为修改后的权利要求范围能够得到支持，并认可创造性。
案例二：AlnylamLeqvio®（inclisiran，英克司兰）中国专利无效案
- 无效宣告请求主要理由：权利要求得不到说明书支持、不具备创造性等。
- 无效决定：母案专利和分案专利均维持有效，合议组认为权利要求能够得到说明书支持，并认可创造性。
案例看siRNA中国专利授权标准——小结
- 关于是否清楚、得到说明书支持：序列类似“至少…个核苷”的限定可能存在不清楚问题，siRNA裸序列的创造性需考虑序列区别、靶核酸位点及现有技术启示，意料不到的技术效果是关键。
- 关于创造性：对于长度“19-23个核苷”类似的限定，仅“1-2个核苷的变化”可能被支持，过多的变化则可能不支持；化学修饰的限定需考察实施例中是否所有核苷酸都以权利要求限定的修饰方式进行了修饰，并且显示效果；siRNA修饰的创造性需考虑裸序列存在新创性问题时，具体修饰是否显而易见，以及修饰后的效果是否可预期；递送方式/配体对于siRNA活性分子而言，“配体”部分能够相对独立地实现完整产品的部分功能。
