优化 BRET 饱和度测定以进行稳健和灵敏的细胞溶质蛋白质-蛋白质相互作用研究

这篇科学报告描述了一种改进的BRET饱和度测定方法，用于研究细胞溶质蛋白质-蛋白质相互作用。研究人员通过使用更明亮的Nluc/YFP BRET对，并扩展A:D表达检测范围和标准化A:D表达，大大提高了BRET饱和度测定的稳健性和灵敏性。此外，他们还发现，在使用可变数量而不是固定数量的供体分子与增加的受体浓度共表达时，BRET饱和测定的稳健性可以进一步提高。这种方法可以应用于许多PPI网络，包括NF-κB通路、高亲和力纳米抗体、狂犬病病毒-宿主相互作用、mTOR复合物和JAK/STAT信号传导。总之，这项研究为活细胞中强大的PPI验证和表征铺平了道路。