确保脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒）的质量、安全性和有效性的建议，附件2

POST-ECBS版本只说 英语 确保脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒）的质量、安全性和有效性的建议 替换世卫组织第980号技术报告系列附件2 世界卫生组织生物标准化专家委员会第七十六次会议通过，2022年10月24-28日。本文件的最终版本将在编辑而非科学细节上与本版本不同，将在世卫组织技术报告系列中发布. ©2023年世界卫生组织 保留所有权利。 本文件草案中使用的名称和材料的表述方式并不意味着世界卫生组织对任何国家、领土、城市或地区或其当局的法律地位，或对其边界或边界的划定表示任何意见。地图上的虚线表示可能尚未完全达成一致意见的大致边界线。 提及特定公司或某些制造商的产品并不意味着它们得到世界卫生组织的认可或推荐，而不是未提及的类似性质的其他产品。除错误和遗漏外，专有产品的名称以首字母大写字母区分。 世界卫生组织已采取一切合理的预防措施，以核实本文件草案所载的信息。但是，分发印刷材料时不提供任何明示或暗示的保证。解释和使用材料的责任在于读者。在任何情况下，世界卫生组织均不对因使用其而造成的损害负责。 本文件草案不一定代表世界卫生组织的决定或既定政策。仅指定作者[或适当的编辑]对此处表达的观点负责。 附件2 确保脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒）的质量、安全性和有效性的建议 替换世卫组织第980号技术报告系列附件2 介绍6 目的和范围8 术语8 一般注意事项10 国际参考材料16 部分答:生产建议17 A.1 A.2 A.3 A.4 A.5 A.6 A.7 A.8 A.9 A.10分布和运输33 A.11 B部分：脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒)34 B.1 B.2 B.3 C部分脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒)35 C.1 C.2 C.3 d部分的建议国家管制当局方面39 D.1 D.2 E部分脊髓灰质炎疫苗（口服、活疫苗、减毒疫苗）的建议 准备在初级猴肾细胞41 作者和确认 46 参考文献 48 附录1 病毒种子用于口服脊髓灰质炎疫苗生产的概述 57 附录2 神经毒力的体内试验和与检测选择相关的注意事项 61 附录3 使用细胞库生产脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒）期间进行的细胞培养测试示例流程图 66 附录4 用于测定脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒）病毒含量的细胞培养技术 68 附录5 生产和控制脊髓灰质炎疫苗（口服、活疫苗、减毒疫苗）的示范摘要方案 69 附录6 脊髓灰质炎疫苗（口服、活疫苗、减毒疫苗）的NRA/NCL批次放行证书范本 94 附录7 使用原代猴肾细胞生产脊髓灰质炎疫苗（口服、活、减毒）期间进行的细胞培养试验示例流程图 96 附录8 脊髓灰质炎疫苗（口服、活疫苗、减毒疫苗）国际参考材料 97 世界卫生组织（世卫组织）发布的建议旨在具有科学性和咨询性。以下各节都构成对国家监管机构 （NRA）和生物制品制造商的建议。如果非国家机构愿意，这些世卫组织建议可作为明确的国家要求予以通过，或者由非国家机构提出合理修改理由。建议对这些建议进行修改，条件是此类修改必须确保产品至少与根据以下建议制备的产品一样安全和有效。每个部分以小字体印刷的部分是注释或示例，旨在为制造商和NRA提供额外的指导。 缩写 5′utr。5′端非翻译区 bopv双价口服脊髓灰质炎疫苗CBERFDA生物制品评估和研究中心 赛迪50细胞培养感染剂量的50%cvdpv传播的疫苗衍生脊髓灰质炎病毒 epi扩大免疫规划eul紧急使用清单 GAPIII世卫组织全球行动计划，旨在在特定类型根除野生脊灰病毒和连续停止口服脊灰疫苗使用后尽量减少脊灰病毒设施相关风险 GAPIV世卫组织脊髓灰质炎病毒遏制全球行动计划 gpei全球根除脊髓灰质炎行动高温超导高通量测序 ipv灭活脊髓灰质炎疫苗 通过聚合酶链反应和限制性内切酶切割进行MAPREC突变体分析 mcb主细胞库 mnvt猴子神经毒性测试 单价口服脊髓灰质炎疫苗单价口服脊髓灰质炎疫苗 nat核酸扩增技术ncl国家控制实验室 NIBSC国家生物标准与控制研究所nOPV新型口服脊髓灰质炎疫苗步枪协会国家监管机构 nvt神经毒性测试 口服脊髓灰质炎疫苗口服脊髓灰质炎疫苗 pcr聚合酶链反应rcdna残余细胞DNA RCT40高温下的繁殖能力 rsorna-plaque-purified萨宾原始 免疫战略咨询专家组世卫组织免疫战略咨询专家组SNP单核苷酸多态性所以萨宾原始 som萨宾原始默克sop标准操作程序(s)sv40猴病毒40 tgmnvt转基因小鼠神经毒性测试 TgPVR21小鼠表达人脊髓灰质炎病毒受体tOPV三价口服脊髓灰质炎疫苗的转基因小鼠 vapp疫苗相关麻痹脊髓灰质炎wcb工作细胞库 野生脊髓灰质炎病毒的野生脊髓灰质炎病毒 介绍 世卫组织对口服脊髓灰质炎疫苗的要求于1962年首次制定（1），并于1966年（2）和1972年（3）进行了修订，当时增加了描述人二倍体细胞中口服脊髓灰质炎疫苗产生的附录。这些要求在1982年进一步更新（4），以反映数据的积累，特别是关于猴子神经毒力测试（MNVT）的性能和评估以及人类二倍体细胞核学测试的数据。这些要求随后于1989年进行了全面更新（5），以考虑到1985年通过的世卫组织对用于生物制品生产的连续细胞系的要求（6），世卫组织研究小组得出结论，原则上，此类细胞系可用作生产生物制剂的底物（7）。随后通过了一项增编（8），其中：（a）对猿猴病毒40（SV40）的可检测DNA序列的检测进行了修改;（b）对猿猴病毒40（SV40）的检测进行了修改;（b）对猿猴病毒40（SV40）的检测进行了修改;（b）对猿猴病毒40（SV40）的检测进行了修改;（c）对猿猴病毒40（SV40）的检测（b）采用聚合酶链反应和限制性内切酶裂解（MAPREC）测定进行突变体分析，作为3型脊髓灰质炎病毒的可选附加体外检测;（c）提高对野生脊灰病毒的实验室控制水平;以及（d）为来自封闭灵长类动物菌落的动物提供额外的抗体筛查测试 （泡沫病毒）的指导，这些动物被用作原代猴肾细胞的来源。 这些要求随后于1999年进行了全面修订（9），成为世卫组织关于生产和控制脊髓灰质炎疫苗（口服）的建议。引入的变化包括使用表达人脊髓灰质炎病毒受体（TgPVR21小鼠）（10）的转基因小鼠作为3型病毒MNVT的替代品，以及引入MAPREC测定作为体外测试的首选测试，用于评估3型脊髓灰质炎病毒的过滤散装混悬液（11）。如果进行了MAPREC，则先前规定的高温生殖能力（rct40）测试成为可选的附加测试。2000年，在完成对TgPVR21小鼠1型和2型脊髓灰质炎病毒的研究之后，通过了建议书的附录（12），其中包括转基因小鼠神经毒力试验（TgmNVT）作为所有三种脊髓灰质炎病毒血清型MNVT的替代方法。 2012年，通过了全面修订的世卫组织建议，以确保脊髓灰质炎疫苗（口服、活疫苗、减毒疫苗）的质量、安全性和有效性。经修订的建议提供了关于用于生产口服脊髓灰质炎疫苗的不同病毒株来源的最新信息，并考虑了新的单价口服脊髓灰质炎疫苗和二价口服脊髓灰质炎疫苗配方（13 ）。根据技术发展，还提供了关于国际标准和其他参考材料、一般生产建议和控制测试以及世卫组织TgmNVT和MAPREC标准操作程序（SOP）的更新章节。其他变化包括增加了关于口服脊髓灰质炎疫苗非临床和临床评价的新章节，更新了术语，并引入了仅适用于世卫组织提供的病毒主种子的“病毒次主种子批次”概念。还就神经毒力检测（MNVT和TgmNVT）的使用和MAPREC检测提供了更新的指导，该检测已扩展到包括所有三种类型的病毒种子和疫苗散装。还提供了指导猴子或小鼠神经毒力测试选择的基本原理。 自那时以来，全球根除脊髓灰质炎方面取得了重大进展，在科学知识、新型实验室技术（包括使用高通量测序（HTS），也称为下一代测序、大规模并行或深度测序）以及开发用于质量控制检测的新型非致病性脊髓灰质炎病毒株方面取得了重要进展。世卫组织分别于2015年和2019年宣布在全球消灭血清2型和3型野生脊灰病毒。2016年初，在宣布消灭野生脊灰病毒血清2型疫苗之后 ，全球使用三价口服脊髓灰质炎疫苗 常规免疫被仅使用仅含有血清型1和3的bOPV所取代。因此，不再常规使用tOPV疫苗，现在将bOPV用于常规和补充免疫。针对2型的单价口服脊髓灰质炎疫苗（mOPV2）用于控制2型循环疫苗衍生脊灰病毒（cVDPV2）的暴发。此外，世卫组织免疫战略咨询专家组批准将tOPV用于控制与1型野生脊灰病毒传播同时发生的循环的2型疫苗衍生脊灰病毒疫情。开发了设计合理且遗传更稳定的Sabin2型脊髓灰质炎病毒株，以尽量减少疫苗株向毒力的逆转，并已用于生产新型口服脊髓灰质炎病毒（nOPV2）。2020年底，根据世卫组织紧急使用清单程序，引入了2型单价口服脊灰病毒用于循环的2型疫苗衍生脊灰病毒疫情控制（14）。 自2012年修订世卫组织建议以来，还发布了新的世卫组织指导文件。2014年通过了世卫组织全球行动计划，以在消灭野生脊灰病毒和连续停止口服脊灰疫苗后，将脊灰病毒设施相关风险降至最低（GAPIII）（15），随后于2022年编制了经修订的第4版（GAPIV）（16）。因此，处理脊髓灰质炎活病毒的生物安全和生物安保要求收紧，导致2018年通过了经修订的世卫组织脊髓灰质炎疫苗安全生产和质量控制指南（17），随后于2020年进行了修订（18）。同样在2020年，世卫组织生物标准化专家委员会建议修订2012年口服脊髓灰质炎疫苗建议。作为回应，世卫组织召集了一个由国家监管机构组成的起草小组来编写经修订的文件。世卫组织于2021年11月15日至17日举行了一次虚拟非正式磋商，来自学术界、国家监管机构/国家控制实验室、工业界以及参与口服脊髓灰质炎疫苗研究、制造、授权和测试/释放的其他国际组织和机构的专家和代表出席了磋商，就修订过程中要解决的问题进行了讨论并达成共识（19）。 经修订的建议书涉及的主要问题包括： 在口服脊髓灰质炎疫苗的质量控制中使用高温超导剂作为MAPREC测定的替代方法，作为首选的体外试验; 分析HTS产生的全基因组突变图谱，作为未来可能替代MNVT和TgmNVT的常规批次发布，一旦建立生产一致性-这些领域的实践经验目前有限，将在适当的时候提供进一步的指导; 取消RCT40测试，因为其敏感性和对WPV作为对照菌株的要求不足，使GAPIV合规性复杂化; 考虑非口服脊髓灰质炎疫苗菌株的设计、制造和质量控制; 使用新的非致病菌株测量脊髓灰质炎病毒的中和抗体; 更新与口服脊髓灰质炎疫苗制造和控制有关的国际参考材料，并列入关于此类材料的新附录; 更新的术语; 除萨宾口服脊髓灰质炎疫苗外，还引入了针对非口服脊髓灰质炎疫苗毒株的“病毒亚主种子”概念;和 对可能开发的新的和更安全的口服脊髓灰质炎疫苗毒株进行临床评估。 还作了其他修改，以参考本文件，并使本文件与世卫组织自上次修订以来发表的其他建议保持一致。 目的和范围 世卫组织的这些建议为NRA和制造商提供了制造工艺、质量控制以及非临床和临床评估方面的指导，以确保脊髓灰质炎减毒活疫苗（口服）的质量、安全性和有效性。 这些建议的范围包括源自原始萨宾菌株的脊髓灰质炎减毒活疫苗（口服），其中一些通过简单途径，另一些通过更复杂的途径，包括斑块纯化。该文件旨在适用于由萨宾脊髓灰质炎病毒株及其衍生物制备的所有口服脊髓灰质炎疫苗产品。 该文件还考虑了在制造和控制由萨宾病毒靶向遗传操作产生的合理设计的菌株以及引入高温超导剂作为非生物口服脊髓灰质炎疫苗和萨宾口服脊髓灰质炎疫苗的质量控制方法中提出的问题 。 在本文件中，“OPV”是指由任何减毒脊髓灰质炎病毒制成的口服脊髓灰质炎疫苗，包括原始萨宾毒株和新型转基因毒株。在某些情况下，“萨宾口服脊髓灰质炎疫苗”和“非口服脊髓灰质炎疫苗”用于区分经典口服脊髓灰质炎疫苗和新型口服脊髓灰质炎疫苗。 世卫组织的这些建议应与世卫组织其他相关指南和指导文件一并阅读，例如关于疫苗的非临床